4.3 Ph­¬ng ph¸p quang phæ huúnh quang

Ph­¬ng ph¸p quang phæ huúnh quang lµ ph­¬ng ph¸p ph©n tÝch dùa trªn phÐp ®o c­êng ®é huúnh quang ph¸t ra tõ mét chÊt ho¸ häc khi nã ®­îc kÝch thÝch do hÊp thô bøc x¹ tö ngo¹i, kh¶ kiÕn hoÆc c¸c bøc x¹ ®iÖn tõ kh¸c. Trong ph­¬ng ph¸p nµy, c­êng ®é huúnh quang cña chÊt thö ®­îc so s¸nh víi c­êng ®é huúnh quang cña chÊt chuÈn ®o trong cïng ®iÒu kiÖn.

M¸y

VËn hµnh m¸y quang phæ huúnh quang theo chØ dÉn cña h·ng s¶n xuÊt m¸y.

Ph­¬ng ph¸p tiÕn hµnh

ChuÈn bÞ dung dÞch nh­ m« t¶ trong chuyªn luËn, chuyÓn dung dÞch vµo cèc ®o cña m¸y quang phæ huúnh quang vµ chiÕu vµo nã bøc x¹ kÝch thÝch víi b­íc sãng ®¬n s¾c ®· ®­îc ghi trong chuyªn luËn. §o c­êng ®é huúnh quang cña dung dÞch ë b­íc sãng ph¸t huúnh quang  ®­îc ghi trong chuyªn luËn.

§Ó ®Þnh l­îng, ®­a vµo m¸y cèc ®ùng dung m«i hoÆc hçn hîp dung m«i dïng ®Ó hoµ tan mÉu thö  vµ ®iÒu chØnh m¸y vÒ ®iÓm "0". §­a dung dÞch chuÈn ®· ®­îc chuÈn bÞ nh­ m« t¶ trong chuyªn luËn vµo m¸y vµ ®iÒu chØnh ®é nh¹y cña m¸y ®Ó kÕt qu¶ ®äc trªn thang ®o lín h¬n 50. NÕu thay ®æi khe s¸ng khi ®iÒu chØnh lÇn thø hai th× ph¶i ®Æt l¹i ®iÓm 0 vµ  c­êng ®é huúnh quang cña chuÈn còng ph¶i ®­îc ®o l¹i. Cuèi cïng, ®­a mÉu thö vµo m¸y, ®o c­êng ®é huúnh quang vµ tÝnh nång ®é cña dung dÞch thö theo c«ng thøc sau:

 

                                        C_x = ( I_x x C_s ) / I_s

 

Trong ®ã:

C_s vµ C_x lÇn l­ît lµ nång ®é cña dung dÞch chuÈn vµ dung dÞch thö.

I_s vµ I_x lÇn l­ît lµ c­êng ®é huúnh quang cña dung dÞch chuÈn vµ dung dÞch thö.

Khi c­êng ®é huúnh quang kh«ng thËt sù tû lÖ thuËn víi nång ®é, viÖc ®Þnh l­îng cã thÓ ®­îc thùc hiÖn dùa trªn ®å thÞ chuÈn.

Trong mét sè tr­êng hîp, phÐp ®Þnh l­îng cã thÓ ®­îc so s¸nh víi mét mÉu chuÈn ®èi chiÕu cã b¶n chÊt ho¸ häc kh¸c mÉu thö (VÝ dô: thñy tinh ph¸t huúnh quang hoÆc dung dÞch mét chÊt ph¸t huúnh quang kh¸c víi mÉu thö). Trong tr­êng hîp nµy, nång ®é cña chÊt thö ph¶i ®­îc x¸c ®Þnh b»ng ®å thÞ chuÈn ®o trong cïng ®iÒu kiÖn víi mÉu thö.